LABORATORIO DE URGENCIAS

 

Interferencias

Interference Testing in Clincal Chemistry (NCCLS Vol 6 Nº13)

 

El termino interferencia analítica es usado en un sentido amplio para indicar "el efecto de una sustancia sobre algún paso en la determinación de la concentración o actividad de un analito". El analito es el componente que se intenta medir en una muestra, la interferencia es un componente de la muestra, distinto al analito, que altera el resultado final del dosaje. La interferencia puede perturbar el proceso analítico de diversas formas:
A) Efecto físico:
      * Las propiedades físicas de la sustancia interferente puede ser detectada y afectar en el proceso de medición (sustancias con color,
         sustancias con fluorescencia, etc)
      * La sustancia interferente puede afectar las características de la muestra (viscosidad, turbidez, fuerza iónica)
B) Efecto químico:
      * La sustancia interferente puede afectar el principio de una reacción (disminución de la actividad enzimática por secuestro de algun metal
         activador de la enzima)
      * La sustancia interferente puede evitar que se produzca una reacción (desnaturalizando el reactivo)
      * La sustancia interferente puede alterar la forma del analito a medir (formando complejos con el analito)
C) Efecto no específico
La sustancia interferente puede reaccionar de la misma manera que el analito a medir (cetoácidos en el método de Jaffe para creatinina, reacción cruzada con el anticuerpo en inmunologia, proteinas que actuan sobre el mismo sustrato que el analíto en una reacción enzimática)
D) Por desplazamiento de fase acuosa (altos niveles de lípidos o proteínas) 

Las interferencias son una de las mayores causas de errores analíticos, muy pocos métodos pueden ser considerados libres de todo tipo de interferencias. 
En el ámbito de los laboratorios la capacidad de detectar situaciones, condiciones que puedan alterara resultados  queda limitado a las interferencias que afectan las condiciones de las muestras analizadas generando condiciones que visualmente resultan obvias para el operador, estamos haciendo referencia a hemólisis, ictericia y lipemia.
La detección de interferencias es uno de los topicos todavia no bien resuelto en el ámbito de los laboratorios.
Cuando se habla de Interferencias es necesario definir cual es la magnitud del efecto que constituye una interferencia. Si el efecto genera una variación que cae dentro de los límites de imprecisión del método y/o  la magnitud del error que se genera no es lo suficientemente grande como para afectar las decisiones médicas, la sustancia NO debe ser considerada  interferencia.

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Se presenta documento publicado relacionado al tema. Es parte  del manual de procedimientos en la etapa pre-analítica del servicio de laboratorio del Hospital Universitario "Virgen de la Victoria" - España.

Autores: Antonia Muños; Juan E. Sanchez Fernandez; Gonzalo Callejon Martin

Las interferencias pueden presentarse en la muestra debido a fuentes endógenas o exógenas.
Pueden ser producidas in vivo en ciertas condiciones patológicas (p.e., bilirrubina, lípidos, proteínas, hemoglobina, etc.), administradas a los pacientes durante el tratamiento (p.e., drogas, nutrición parenteral, expansores del plasma, anticoagulantes, etc.) auto administradas (suplementos nutricionales, alcohol y drogas de abuso, etc.), debidas a contaminación de la muestra (anticoagulantes, conservantes, separadores del suero, etc.) o por algún incidente en la etapa preanalítica (hemolisis).
Se evalúan una serie de situaciones:
A) Suero Ictérico.
Una concentración de bilirrubina superior a 430 μmol/L (25 mg/L) interfiere en la medida de distintos analitos dando lugar a incrementos en la concentración de los mismos. Puede interferir en la determinación de albúmina, colesterol, glucosa y proteínas totales.
B) Suero Lactescente.
Una alta concentración de triglicéridos en el suero da lugar a una turbidez, que provoca resultados elevados para aquellas sustancias cuyas determinaciones se basan en la absorbancia a las mismas longitudes de onda en que las partículas de lípido también absorben luz y en que la lectura final de la absorbancia se utiliza como índice del valor de la concentración de la sustancia que hay que determinar. Se pueden producir interferencias en la determinación de albúmina, calcio y fosfato inorgánico. Se produce una inhibición en la actividad de la amilasa, uricasa y ureasa, y una disminución en las concentraciones de creatincinasa, bilirrubina y proteínas totales.
C) Suero Hemolízado.
La lisis de los elementos formes de la sangre puede contaminar el suero o el plasma dando lugar a un incremento o disminución en la concentración de diferentes analitos. Se producen aumentos en las concentraciones de Lactato deshidrogenasa (LDH), Aspartato aminotransferasa (ASAT o GOT), Alanin aminotransferasa (ALAT o GPT), Fósforo inorgánico, Potasio, Calcio, Cinc y Magnesio; se produce un incremento en la actividad sérica de Fosfatasa ácida y en la concentración de Albúmina y Bilirrubina. Una solución al 1% de eritrocitos lisados produce un aumento del 98% de la actividad media de la Creatincinasa del suero en individuos sanos . La lisis de las plaquetas provoca fuertes aumentos en la concentración sérica de Potasio y Magnesio, así como en las actividades séricas de Fosfatasa ácida y Aldolasa. La granulocitosis produce aumentos en las concentraciones de Lisozima, Arginasa, Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y 14 Glutamato deshidrogenasa. La hemólisis puede producir disminución en la concentración de Glucosa y Sodio. La lisis de los elementos formes de la sangre puede producirse durante la toma de muestras en los tubos de vacío por la fuerte expansión de sangre o por la mezcla con unanticoagulante. También puede producirse durante la centrifugación y separación del suero o plasma en el procesamiento de la muestra., ,
D) Interferencias Químicas.
Son numerosas las sustancias que pueden dar lugar a variaciones en la medida de la concentración de un analito.
Se listan interferencias químicas sobre las pruebas clínicas más usuales en los laboratorios de urgencia
Determinados anticoagulantes como el oxalato potásico provocan un aumento de la presión osmótica del plasma, dando lugar a un transporte de agua desde las células sanguíneas al plasma y a una dilución del mismo. Los quelantes del calcio producen inhibición en la actividad de diferentes enzimas para las cuales este ión es fundamental. Se produce inhibición en la actividad de la Amilasa, LDH y Fosfatasa ácida

ANALITO                     INTERFERENCIAS                            EFECTO

 

Amilasa                          Citrato                                          Disminución

                                      Oxalato                                          Incremento

Bilirrubina                    Novobiocina                                     Incremento

                                     Acido Ascórbico                                Disminución

                                     Cafeína                                            Disminución

                                     Teofilina                                           Disminución

Calcio                           Sales de citrato                                 Disminución

                                     EDTA                                               Disminución

Cloro                             Bromuro                                          Incremento

Colesterol                      Bromuro                                         Incremento

Creatinina                     Ácido Ascórbico                                Incremento

                                      Barbitúricos                                     Incremento

                                      Cefalosporinas                                  Incremento

                                      Glucosa                                            Incremento

                                      Levodopa                                          Incremento

                                      Metildopa                                          Incremento

Fosfatasa alcalina         Fluoruros                                           Disminución

                                      Oxalatos                                            Disminución

                                      Teofilina                                             Disminución

Glucosa                         Acetaminofén                                     Incremento

                                     Ácido Ascórbico                                   Incremento

                                     Ácido Aminosalicílico                            Incremento

                                     Hidralacina                                          Incremento

                                     Ácido Nalidíxico                                   Incremento

                                     Levodopa                                            Incremento

                                     Mercaptopurina                                   Incremento