LABORATORIO DE URGENCIAS

Microbiota e Insuficiencia Cardíaca

                                                                                         
                                                                         Kimberleigh Romano.PhD; Ina Nemet,PhD; Prasenjit Prasa Saha,PhD:
                                                                         Arash Hachikia,MD; Xinmin Li,PhD; Stanley Hazen,MD.PhD; et al
                                                                                                    Department of Cardiovascular and Metabolic Sciences at the Lerner Research Institute

                                                                                                    Circulation: Heart Failure (Dec. 2022); vol: 16; (1) 
                                                                                                 https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.122.009972

Se sabe que la microbiota intestinal contribuye a diversas enfermedades humanas, incluidas las enfermedades cardiovasculares (ECV), y representa un órgano endocrino aún poco valorado. Los mecanismos por los cuales la comunidad microbiana intestinal contribuye a los procesos patológicos siguen siendo en gran medida desconocidos. Un paso fundamental para abordar esta laguna de conocimiento es comprender las asociaciones entre los metabolitos generados por la microbiota intestinal y los fenotipos clínicos, así como la actividad de los metabolitos derivados de la microbiota intestinal, que pueden funcionar como hormonas no canónicas.
Con una mejor comprensión de los participantes moleculares involucrados en las enfermedades vinculadas a la microbiota intestinal, podríamos diseñar estrategias terapéuticas eficaces para combatir las dolencias relacionadas con el estilo de vida moderno, como la obesidad, la diabetes y las ECV.
Mediante metabolómica no dirigida, nuestro laboratorio identificó recientemente la fenilacetilglutamina (PAGln), un metabolito metaorganísmico derivado de la microbiota asociado con las ECV y los principales eventos cardiovasculares adversos (infarto de miocardio, accidente cerebrovascular o muerte). Los estudios de ganancia y pérdida de función, que utilizaron una combinación de herramientas genéticas y farmacológicas, demostraron que la PAGln transmite señales dentro de las células huésped a través de receptores acoplados a proteínas G, incluidos los receptores adrenérgicos. Está bien establecido que el tono simpático se eleva en la insuficiencia cardíaca (IC), y se cree que la activación sostenida del sistema nervioso simpático contribuye al mal pronóstico asociado con la IC. Además, la incorporación de betabloqueantes a los regímenes de tratamiento de la IC todavía se recomienda según las guías clínicas actuales. Dada la conexión directa entre la PAGln, la enfermedad cardiovascular (ECV) y la señalización adrenérgica, nos propusimos examinar la asociación clínica entre la PAGln y la IC, e investigar si la PAGln puede promover o modular fenotipos relevantes para la IC. Aquí mostramos que los niveles circulantes de PAGln se correlacionan con el riesgo clínico de IC y la gravedad de la enfermedad en dos cohortes independientes (EE. UU. y Europa). Ampliamos estas asociaciones clínicas para demostrar que la PAGln, así como su homólogo murino PAGly, contribuye directamente a las manifestaciones fisiológicas de fenotipos relevantes para la insuficiencia cardíaca (IC), incluyendo la inducción del péptido natriurético tipo B (BNP) y efectos supresores miocárdicos indirectos (indirectos porque solo se observan en presencia de un agonista simpático). En conjunto, nuestros hallazgos respaldan la idea de que el metabolito PAGln, generado por la microbiota intestinal, es un posible marcador y un factor contribuyente a los fenotipos asociados a la IC.

MÉTODOS

Disponibilidad de datos
Existen restricciones en la disponibilidad de algunos de los datos clínicos generados en el presente estudio, ya que no contamos con el consentimiento informado de los participantes para compartir datos fuera de nuestra institución, salvo en formato resumido. Cuando sea posible, los conjuntos de datos generados y/o analizados durante los presentes estudios, o los datos resumidos, así como todos los métodos utilizados para llevar a cabo la investigación, están disponibles a solicitud razonable del autor correspondiente.

Banco de genes: Cohorte de EE. UU.
Se recolectaron muestras de plasma y datos clínicos asociados como parte de estudios en un centro de referencia de atención terciaria. Todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito, y el Comité de Ética de la Investigación de la Clínica Cleveland aprobó todos los protocolos del estudio. Se realizaron estudios metabolómicos en muestras secuenciales de un extenso y bien caracterizado repositorio longitudinal de tejidos con una base de datos clínica asociada, denominado Banco de genes de la Clínica Cleveland: Determinantes moleculares de la enfermedad arterial coronaria. El Banco de genes está registrado en ClinicalTrials.gov con el identificador NCT00590200. Está compuesto por participantes estables, sin evidencia de síndrome coronario agudo (troponina I cardíaca <0,03 ng/mL), que se sometieron a una angiografía coronaria diagnóstica electiva (cateterismo cardíaco o tomografía computarizada coronaria) para la evaluación de la enfermedad arterial coronaria (EAC). Todos los participantes contaron con un amplio seguimiento de datos clínicos y de resultados longitudinales, incluyendo resultados adjudicados durante los 3 a 5 años posteriores a su inclusión en el estudio. Los antecedentes de insuficiencia cardíaca se detectaron mediante (a) preguntas directas del personal de investigación al paciente, (b) revisión de los registros médicos para su confirmación (todos los pacientes fueron atendidos por un cardiólogo en la Clínica Cleveland antes del cateterismo cardíaco izquierdo) y (c) códigos de la Clasificación Internacional de Enfermedades y adjudicación por parte del personal de investigación.¹² Los niveles de NT-proBNP se midieron en todas las muestras de GeneBank por el Laboratorio de Investigación Preventiva (PRL), un laboratorio de referencia CAP y CLIA. Las mediciones de NT-proBNP se realizaron utilizando el ensayo Elecsys proBNP II STAT en el analizador Roche Cobas e601. Para los presentes estudios, aprovechamos el acceso a los niveles de PAGln previamente informados, obtenidos mediante cromatografía líquida de dilución isotópica estable acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS) de sujetos consecutivos que dieron su consentimiento y para quienes se disponía de datos de PAGln, fracción de eyección del ventrículo izquierdo y NT-proBNP (n=3256).

LipidCardio: Cohorte Europea
También se obtuvieron muestras de plasma (n=833) de sujetos inscritos en el estudio LipidCardio del Charité-Universitätsmedizin Berlin: Papel de las lipoproteínas en la enfermedad cardiovascular.¹³ El estudio fue aprobado por el comité de ética de investigación local (número de aprobación: EA1/135/16) bajo un protocolo aprobado registrado en el Registro Alemán de Ensayos Clínicos (drks.de); Identificador: DRKS00020915. Todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito. Podían participar pacientes de 18 años o más sometidos a cateterismo cardíaco en un único centro académico de gran tamaño (Departamento de Cardiología, Campus Benjamin Franklin, Charité-Universitätsmedizin Berlin), excepto aquellos con síndromes coronarios agudos (SCA) con troponina positiva. La insuficiencia cardíaca (IC) se definió como clase ≥2 de la New York Heart Association. Se midió el NT-proBNP en todas las muestras de los sujetos de la Cohorte Europea mediante el ensayo Elecsys proBNP II STAT en el analizador Roche Cobas e601.
Análisis LC/MS/MS de PAGln en muestras de plasma humano y PAGly en muestras de plasma de ratón.
Se utilizó cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS) con dilución isotópica estable para la cuantificación de PAGln en plasma humano (Cohorte Europea) y PAGly en plasma de ratón, como se describió previamente.⁸ Brevemente, se añadió metanol frío con estándar interno (D5-fenilacetilglutamina) a las muestras de plasma, seguido de agitación en vórtex y centrifugación (14 000 rpm; 4 °C durante 15 min). El sobrenadante transparente se transfirió a viales de vidrio con microinsertos y se sometió a análisis LC/MS/MS. El análisis LC/MS/MS se realizó en un sistema cromatográfico que consta de 2 bombas Shimadzu LC-30 AD (Nexera X2), un horno CTO 20AC que opera a 30 °C y un automuestreador SIL-30 AC-MP en tándem con un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo (serie 8050, Shimadzu Scientific Instruments, Inc., Columbia, MD). Para la separación cromatográfica, se utilizó una columna Kinetex C18 (50 mm × 2,1 mm; 2,6 μm; Catálogo n.° 00B-4462-AN, Phenomenex, Torrance, CA). El solvente A (ácido acético al 0,1 % en agua) y B (ácido acético al 0,1 % en acetonitrilo) se ejecutaron utilizando el siguiente gradiente: 0,0 min (0 % B); 0,0 a 2,0 min (0 % B); 2,0 a 5,0 min (0%B→20%B); 5,0 a 6,0 min (20%B→60%B); 6,0 a 7,5 min (60%B→70%B); 7,5 a 8,0 min (70%B→100%B); 8,0 a 9,5 min (100%); 9,5 a 10 min (100%B→0%B); 10,0 a 15,0 min (0% B) con un caudal de 0,4 mL/min y un volumen de inyección de 1 µL. Se utilizó ionización por electrospray en modo positivo con monitorización de reacciones múltiples (MRM) para la detección de estándar interno endógeno y marcado con isótopos estables. Se utilizaron las siguientes transiciones: m/z 265,2→130,15 para PAGln, m/z 193,8→76,1 para PAGly y m/z 270,1→130,15 para D5-PAGln. D5-PAGln se utilizó como estándar interno tanto para PAGln como para PAGly. Se aplicaron los siguientes parámetros de la fuente de iones: flujo de gas nebulizador, 3 l/min; flujo de gas de calentamiento, 10 l/min; temperatura de la interfaz, 300 °C; temperatura de la línea de desolvatación, 250 °C; temperatura del bloque calefactor, 400 °C; y flujo de gas de secado, 10 l/min. El límite de detección y el límite de cuantificación para PAGln fueron 0,010 y 0,033 µM, respectivamente; Los límites de detección y cuantificación de PAGly fueron de 0,021 y 0,073 µM, respectivamente. Se analizaron muestras de control de calidad con cada lote de muestras, y las variaciones entre lotes, expresadas como coeficiente de variación, fueron inferiores al 10 % para todos los analitos monitorizados. Los datos se recopilaron y analizaron con el software LabSolution 5.91 (Shimadzu).

LC/MS/MS Analysis of PAGln in Human Plasma Samples and PAGly in Mouse Plasma Samples

Stable-isotope-dilution LC/MS/MS was used for quantification of PAGln in human plasma (European Cohort), and PAGly in mouse plasma, as previously described.⁸ Briefly, ice cold methanol containing internal standard (D₅-phenylacetylglutamine) was added to the plasma samples, followed by vortexing and centrifuging (14 000 rpm; 4 °C for 15 min). The clear supernatant was transferred to glass vials with microinserts and submitted to LC/MS/MS analysis. LC/MS/MS analysis was performed on a chromatographic system consisting of 2 Shimadzu LC-30 AD pumps (Nexera X2), a CTO 20AC oven operating at 30 °C, and a SIL-30 AC-MP autosampler in tandem with a triple quadruple mass spectrometer (8050 series, Shimadzu Scientific Instruments, Inc., Columbia, MD). For chromatographic separation, a Kinetex C18 column (50 mm × 2.1 mm; 2.6 μm; Catalog No. 00B-4462-AN, Phenomenex, Torrance, CA) was used. Solvent A (0.1% acetic acid in water) and B (0.1% acetic acid in acetonitrile) were run using the following gradient: 0.0 min (0% B); 0.0 to 2.0 min (0% B); 2.0 to 5.0 min (0%B→20%B); 5.0 to 6.0 min (20%B→60%B); 6.0 to 7.5 min (60%B→70%B); 7.5 to 8.0 min (70%B→100%B); 8.0 to 9.5 min (100%); 9.5 to 10 min (100%B→0%B); 10.0 to 15.0 min (0% B) with a flow rate of 0.4 mL/min and an injection volume of 1 µL. Electrospray ionization in the positive mode was used with multiple reaction monitoring (MRM) for detection of endogenous and stable isotope labeled internal standard. The following transitions were used: m/z 265.2→130.15 for PAGln, m/z 193.8→76.1 for PAGly and m/z 270.1→130.15 for D₅-PAGln. D₅-PAGln was used as internal standard for both PAGln and PAGly. The following ion source parameters were applied: nebulizing gas flow, 3 l/min; heating gas flow, 10 l/min; interface temperature, 300 °C; desolvation line temperature, 250 °C; heat block temperature, 400 °C; and drying gas flow, 10 l/min. Limit of detection and limit of quantification for PAGln were 0.010 and 0.033 µM, respectively; limit of detection and limit of quantification for PAGly were 0.021 and 0.073 µM, respectively. Quality control samples were run with each batch of samples, and interbatch variations expressed as coefficient of variation were <10% for all analytes monitored. Data were collected and analyzed by LabSolution 5.91 software (Shimadzu)

Análisis de PAGln en plasma humano y PAGly en plasma de ratón mediante LC/MS/MS.
Se utilizó LC/MS/MS con dilución isotópica estable para la cuantificación de PAGln en plasma humano (cohorte europea) y PAGly en plasma de ratón, como se describió previamente.⁸ Brevemente, se añadió metanol frío con estándar interno (D5-fenilacetilglutamina) a las muestras de plasma, seguido de agitación en vórtex y centrifugación (14 000 rpm; 4 °C durante 15 min). El sobrenadante transparente se transfirió a viales de vidrio con microinsertos y se sometió a análisis LC/MS/MS. El análisis LC/MS/MS se realizó en un sistema cromatográfico que consta de 2 bombas Shimadzu LC-30 AD (Nexera X2), un horno CTO 20AC que opera a 30 °C y un automuestreador SIL-30 AC-MP en tándem con un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo (serie 8050, Shimadzu Scientific Instruments, Inc., Columbia, MD). Para la separación cromatográfica, se utilizó una columna Kinetex C18 (50 mm × 2,1 mm; 2,6 μm; Catálogo n.° 00B-4462-AN, Phenomenex, Torrance, CA). El solvente A (ácido acético al 0,1 % en agua) y B (ácido acético al 0,1 % en acetonitrilo) se ejecutaron utilizando el siguiente gradiente: 0,0 min (0 % B); 0,0 a 2,0 min (0 % B); 2,0 a 5,0 min (0%B→20%B); 5,0 a 6,0 min (20%B→60%B); 6,0 a 7,5 min (60%B→70%B); 7,5 a 8,0 min (70%B→100%B); 8,0 a 9,5 min (100%); 9,5 a 10 min (100%B→0%B); 10,0 a 15,0 min (0% B) con un caudal de 0,4 mL/min y un volumen de inyección de 1 µL. Se utilizó ionización por electrospray en modo positivo con monitorización de reacciones múltiples (MRM) para la detección de estándar interno endógeno y marcado con isótopos estables. Se utilizaron las siguientes transiciones: m/z 265,2→130,15 para PAGln, m/z 193,8→76,1 para PAGly y m/z 270,1→130,15 para D5-PAGln. D5-PAGln se utilizó como estándar interno tanto para PAGln como para PAGly. Se aplicaron los siguientes parámetros de la fuente de iones: flujo de gas nebulizador, 3 l/min; flujo de gas de calentamiento, 10 l/min; temperatura de la interfaz, 300 °C; temperatura de la línea de desolvatación, 250 °C; temperatura del bloque calefactor, 400 °C; y flujo de gas de secado, 10 l/min.
El límite de detección y el límite de cuantificación para PAGln fueron 0,010 y 0,033 µM, respectivamente; El límite de detección y el límite de cuantificación para PAGly fueron de 0,021 y 0,073 µM, respectivamente. Se analizaron muestras de control de calidad con cada lote de muestras, y las variaciones entre lotes, expresadas como coeficiente de variación, fueron inferiores al 10 % para todos los analitos monitorizados. Los datos se recopilaron y analizaron con el software LabSolution 5.91 (Shimadzu).

Estudios in vitro con células H9c2
Las células H9c2(2-1) (Colección Americana de Cultivos Tipo, ATCC; Manassas, VA) se sembraron en placas de 10 cm con una confluencia del 60%. Tras la siembra (24 horas), las células se mantuvieron en medio sin suero durante 18 horas. Posteriormente, se expusieron a 100 µM de PAGln, 100 µM de PAGly o un volumen equivalente de control (vehículo) durante 4 horas. Tras la exposición, se retiró el medio de cultivo, se lavaron las células con PBS frío y se añadieron 0,5 mL de RNAlater a la placa. Las células se desprendieron mediante raspado y se almacenaron a -20 °C para el aislamiento de ARN. Antes del aislamiento, se añadió 1 mL de PBS estéril a las muestras de RNAlater para facilitar la sedimentación celular. Las células se centrifugaron a 10 000 g durante 3 minutos. Después de retirar el sobrenadante, las células se lisaron en 250 µL de TRIzol (Ambion, Inc; Austin, TX) mediante agitación en vórtex. Se añadieron 50 µL de cloroformo al homogeneizado de TRIzol y las muestras se incubaron a temperatura ambiente durante 3 minutos. A continuación, los tubos se centrifugaron a 10 000 g durante 15 minutos a 4 ºC para la separación de fases. Se retiró la capa acuosa, con cuidado de no perturbar la interfase, y se mezcló con 150 µL de alcohol isopropílico. Las muestras se incubaron a temperatura ambiente durante 10 minutos. Los tubos se centrifugaron a 12 000 g durante 10 minutos a 4 ºC para la sedimentación. Después de retirar el sobrenadante, los precipitados de ARN se lavaron dos veces con etanol al 75 % mediante agitación en vórtex y se centrifugaron a 7500 g durante 5 minutos a 4 ºC. Se retiró el sobrenadante y se dejaron secar los sedimentos al aire durante 10 minutos antes de resuspenderlos en agua tratada con DPEC. La expresión de Nppb (gen precursor del péptido natriurético B) se midió utilizando 400 ng de ARN total con el kit TaqMan RNA-to-Ct de un paso (Applied Biosystems, Waltham, MA) en el sistema de PCR en tiempo real StepOnePlus de Applied Biosystems. Se utilizó Rn00580641_m1 (FAM) para la detección de Nppb y Rn01775763_g1 (VIC) para la detección de Gapdh (gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa).

Expresión génica cardíaca in vivo
Los animales recibieron inyecciones intraperitoneales de PAGln (50 mg/kg; n=16), PAGly (50 mg/kg; n=16) o vehículo isotónico de control (n=14) con pH neutralizado. PAGln y PAGly se disolvieron en solución salina normal y se neutralizaron con NaOH; la solución de control del vehículo consistió en una cantidad equivalente de NaOH/HCl añadida a la solución salina normal. Quince minutos después de la inyección, los animales fueron eutanasiados por sobredosis de Ketamina/Xilazina (300 mg/kg + 30 mg/kg); se recolectó sangre por punción cardíaca del ventrículo derecho. Inmediatamente después de la recolección de sangre, se extrajeron los corazones del animal y se almacenaron en RNAlater. Posteriormente, se aisló la aurícula izquierda completa de cada corazón. Las aurículas se lisaron en 250 µL de TRIzol mediante agitación con perlas con una sola perla de óxido de circonio de 5,0 mm. Se añadieron 50 µL de cloroformo al homogeneizado de TRIzol y las muestras se incubaron a temperatura ambiente durante 3 minutos. Los tubos se centrifugaron a 10 000 g durante 15 minutos a 4 ºC para la separación de fases. Se retiró la capa acuosa, con cuidado de no alterar la interfaz, y se mezcló con 150 µL de alcohol isopropílico. Las muestras se incubaron a temperatura ambiente durante 10 minutos. Los tubos se centrifugaron a 12 000 g durante 10 minutos a 4 ºC para la sedimentación. Después de retirar el sobrenadante, los precipitados de ARN se lavaron dos veces con etanol al 75 % mediante agitación en vórtex y se centrifugaron a 10 000 g durante 8 minutos a 4 ºC. Se retiró el sobrenadante y los precipitados se dejaron secar al aire durante 10 minutos antes de resuspenderlos en agua tratada con DPEC.
La expresión de Nppb se midió utilizando 1,5 µL de ARN total con el kit TaqMan RNA-to-Ct 1-step (Applied Biosystems; Waltham, MA) en el sistema de PCR en tiempo real StepOnePlus de Applied Biosystems. Se utilizó Mm00435304_g1 (FAM) para la detección de Nppb y Mm99999915_g1 (VIC) para la detección de Gapdh. Los investigadores no desconocían los resultados de estos estudios.

Estudios de contractilidad de cardiomiocitos de ratón
Se aislaron cardiomiocitos de ratón adulto de tipo silvestre y se realizaron estudios de contractilidad utilizando el sistema IonOptix (Myopace, Milton, MA), como se describió previamente.^14,15 Brevemente, los miocitos se aislaron y se sembraron en portaobjetos con cámara de vidrio, que se colocaron en una platina microscópica Leica conectada a un estimulador de campo diseñado específicamente para la estimulación de miocitos aislados (MyoPace, IonOptix). Los cardiomiocitos se estimularon a 3 Hz y se obtuvieron imágenes con una cámara de frecuencia de campo variable (MyoCam, IonOptix) utilizando tecnología de detección de bordes y longitud de sarcómero. Los miocitos se trataron con 10 µM de epinefrina y se registraron transitorios de contractilidad de cardiomiocitos en presencia o ausencia de 100 µM de PAGln o PAGly, y se preincubaron durante 15 minutos antes de la adición de epinefrina.
Los ciclos de contracción de sarcómeros individuales se registraron en función del tiempo como transitorios de contractilidad. Se midieron la longitud del sarcómero (µm) y el acortamiento del sarcómero (µm) considerando 5 ventanas de escaneo diferentes.

ESTADÍSTICA

Se utilizó la prueba de suma de rangos de Wilcoxon o la prueba t de Student para variables continuas y la prueba χ² para variables categóricas para examinar la diferencia entre los grupos. Se calculó la razón de probabilidades para la insuficiencia cardíaca binaria y los correspondientes intervalos de confianza del 95 % según los cuartiles de PAGIn en la cohorte de EE. UU. y la cohorte europea mediante modelos de regresión logística univariables (sin ajustar) y multivariables (ajustados). El modelo de regresión logística se ajustó para los factores de riesgo cardíaco tradicionales en un modelo multivariable, que incluía edad, sexo, tabaquismo, presión arterial sistólica, colesterol LDL, colesterol HDL, triglicéridos, proteína C reactiva de alta sensibilidad, diabetes y obesidad (en la cohorte de EE. UU.). El ajuste adicional para la tasa de filtración glomerular estimada (mL/min por 1,73 m2) se calcula sobre la base de la ecuación de creatinina CKD-EPI 2021 de la Colaboración para la Epidemiología de la Enfermedad Renal Crónica.16 La clasificación de la insuficiencia cardíaca (IC), según la fracción de eyección del ventrículo izquierdo (FEVI; IC con fracción de eyección preservada [ICFEp; FEVI ≥50%], levemente reducida [ICFEmr; 40%<FEVI<50%] y reducida [ICFEr; FEVI ≤40%]), se definió según la guía AHA/ACC/HFSA 2022 para el manejo de la IC.17 La presencia de CAD se definió por estenosis luminal de al menos el 50% en cualquier arteria coronaria principal, cualquier antecedente de infarto de miocardio, antecedentes de intervención coronaria percutánea y/o injerto de derivación de arteria coronaria conocido en la cohorte de EE. UU. En la cohorte europea, la enfermedad arterial coronaria (EAC) se definió como una reducción luminal de un vaso epicárdico principal superior al 50 %.
La asociación entre la PAGln y las mediciones clínicas (incluidos los niveles de FEVI o NT-proBNP) se evaluó estadísticamente mediante la prueba de Kruskal-Wallis y la correlación de Spearman tras comprobar la normalidad de los datos.

RESULTADOS

La PAGln se encuentra elevada en pacientes con insuficiencia cardíaca y se asocia de forma independiente con el riesgo de insuficiencia cardíaca.
Previamente informamos que los niveles plasmáticos de PAGln se asocian con la enfermedad cardiovascular (ECV) y la incidencia de eventos cardiovasculares adversos mayores (infarto de miocardio, accidente cerebrovascular o muerte). En ese mismo estudio, demostramos, mediante diversas investigaciones mecanicistas, que la PAGln actúa a través de receptores adrenérgicos. Dado que la alteración del tono simpático es un factor clave en el desarrollo de la insuficiencia cardíaca, nos propusimos evaluar si los niveles sistémicos de PAGln muestran una asociación clínica con el riesgo y la gravedad de la insuficiencia cardíaca. Para los análisis iniciales, utilizamos datos de PAGln previamente publicados (Cohorte de EE. UU.; véase la sección de Métodos para más detalles) para examinar la asociación entre los niveles de PAGln, la insuficiencia cardíaca, la fracción de eyección del ventrículo izquierdo (FEVI) y el NT-proBNP.
Se consideraron las características clínicas, demográficas y los valores de laboratorio de los sujetos (n=3256). Esto muestra una cohorte de mediana edad con alta prevalencia de ECV y factores de riesgo relacionados. Los sujetos con diagnóstico confirmado de insuficiencia cardíaca (IC) presentaron niveles sistémicos de PAGln más elevados en comparación con los sujetos sin IC (P<0,0001). Además, los individuos con insuficiencia cardíaca (IC) sin enfermedad coronaria (EC) presentaron niveles más altos de PAGln que los sujetos control (sin IC ni EC); y los individuos con EC e IC presentaron niveles más altos de PAGln que los sujetos con EC únicamente. Asimismo, se observó un mayor riesgo de IC entre aquellos con niveles circulantes más elevados de PAGln (por ejemplo, cuarto cuartil frente al primero), incluso tras ajustar por los factores de riesgo cardiovascular tradicionales y los índices de función renal.

DISCUSIÓN

Este estudio evaluó datos de más de 3000 estadounidenses y más de 800 europeos. Demostró que los niveles elevados de PAG están relacionados con la insuficiencia cardíaca. Por ejemplo, los individuos con insuficiencia cardíaca con fracción de eyección preservada, en la que existe una falta de relajación del músculo cardíaco entre latidos, presentan niveles elevados de PAG en sangre.
Los niveles de PAG en sangre podrían servir para predecir quién tiene riesgo de desarrollar insuficiencia cardíaca.
Los datos respaldan firmemente la idea de que poner esta prueba a disposición de los médicos ampliaría su arsenal de pruebas diagnósticas para la insuficiencia cardíaca.
Investigaciones anteriores informaron que la PAG puede influir en los receptores adrenérgicos. Las plaquetas, que pueden afectar aspectos como el riesgo de coagulación sanguínea, se describen en el video a continuación. Esta última investigación también demostró que el PAG y la molécula paralela encontrada en ratones, la fenilacetilglicina, promueven cambios en la expresión génica y afecciones relacionadas con la insuficiencia cardíaca, como la reducción de la contractilidad en ciertas células cardíacas.
La insuficiencia cardíaca y las enfermedades cardíacas siguen siendo una de las principales causas de muerte en todo el mundo. Modificar la dieta para influir en los niveles de PAG podría ser una forma de reducir el riesgo de padecer enfermedades cardíacas.
Este estudio amplía considerablemente el abanico de posibles vínculos entre nuestra dieta y cómo la microbiota intestinal actúa como filtro de la misma, influyendo en nuestra susceptibilidad a desarrollar diversas enfermedades. En este caso, los microbios intestinales forman un metabolito a partir del aminoácido fenilalanina presente en las proteínas de la dieta, lo que afecta negativamente la función de las células del músculo cardíaco.
En un nuevo estudio, el equipo busca la bacteria o bacterias y las enzimas que producen, implicadas en la producción de PAG, y cómo reducir sus niveles.
Las modificaciones en la dieta también podrían ser una forma de reducir el riesgo.